此時(shí)，固相酶的量與樣品中被測物質(zhì)的量成一定比例。加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化成有色產(chǎn)物。產(chǎn)品的數(shù)量與樣品中被測物質(zhì)的數(shù)量直接相關(guān)。因此，可以根據(jù)顏色的深度進(jìn)行定性或定量分析。該方法靈敏度高（pgng/ml），重復(fù)性好。

　　人白介素ELISA試劑盒在使用時(shí)須注意下面這些事項(xiàng)：

　　1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

　　2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

　　3、加樣的每一步都應(yīng)使用加樣裝置，并應(yīng)經(jīng)常檢查其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間應(yīng)控制在5分鐘以內(nèi)。如果樣品多，建議使用槍添加樣品。

　　4、每次測量時(shí)請同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，好做雙孔。如果待測物質(zhì)含量過高（樣品的OD值大于標(biāo)準(zhǔn)樣品孔一孔的OD值），請用樣品稀釋劑稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測量。計(jì)算時(shí)，請乘以總稀釋倍數(shù)(× n× 5)。

　　5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6、底物請避光保存。

　　7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

　　8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

　　9、本試劑不同批號組分不得混用。

　　人白介素ELISA試劑盒的計(jì)算是以標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值從標(biāo)準(zhǔn)曲線中找出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)，或用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度和OD值計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，是樣本的實(shí)際濃度。試劑盒性能：線性回歸與樣品預(yù)期濃度的相關(guān)系數(shù)r在0.990以上。批次和批次應(yīng)分別小于9%和11%。