發(fā)布時間： 2024-10-14 點(diǎn)擊次數(shù)： 190次
新生牛血清（NewbornCalfSerum，簡稱NBCS）是通過采集出生0-7天或0-30天內(nèi)的新生牛靜脈血，經(jīng)除菌過濾后制成的用于動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的生物試劑。其質(zhì)量好壞直接影響細(xì)胞的生長情況，因此判斷牛血清的性能至關(guān)重要。
以下是一些關(guān)鍵指標(biāo)和方法來判斷
新生牛血清的性能：
總蛋白含量
定義：總蛋白是牛血清中的重要成分，在細(xì)胞培養(yǎng)中起著維持滲透壓、pH值緩沖、物質(zhì)運(yùn)輸和提供營養(yǎng)等作用。
檢測方法：通過化學(xué)成分分析，測定血清中的總蛋白含量。一般來說，國產(chǎn)牛血清的總蛋白含量在3.7%到4.4%之間。
評估標(biāo)準(zhǔn)：總蛋白含量適中且穩(wěn)定，表明血清質(zhì)量好。如果總蛋白含量過高或過低，可能意味著血清摻假或處理不當(dāng)。
血紅蛋白含量
定義：血紅蛋白是評價牛血清生產(chǎn)工藝好壞的重要指標(biāo)。在采血、運(yùn)輸和儲存過程中，紅細(xì)胞可能會裂解釋放出血紅蛋白。
檢測方法：通常采用分光光度法來測定血紅蛋白含量。
評估標(biāo)準(zhǔn)：優(yōu)質(zhì)的新生牛血清中血紅蛋白含量應(yīng)盡可能低。《中國藥典》三部（2015版）要求血紅蛋白含量不高于200mg/L。血紅蛋白含量高可能導(dǎo)致細(xì)胞受損和下游純化難度增加。
內(nèi)毒素含量
定義：內(nèi)毒素是由革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁裂解釋放的毒素，不利于細(xì)胞生長。
檢測方法：通過定量檢測內(nèi)毒素含量，通常以EU/ml為單位。
評估標(biāo)準(zhǔn)：內(nèi)毒素含量≤10EU/ml為特級，內(nèi)毒素含量＞10EU/ml且≤25EU/ml為優(yōu)級，內(nèi)毒素含量≥25EU/ml為標(biāo)準(zhǔn)級。內(nèi)毒素含量越低，對細(xì)胞生長越有利。
外觀
顏色：根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色。優(yōu)質(zhì)進(jìn)口血清呈現(xiàn)淡黃或微紅色，而劣質(zhì)血清可能呈現(xiàn)橘紅色或鮮紅色。熱滅活或保存不當(dāng)?shù)难鍟尸F(xiàn)暗紅甚至咖啡色。
澄清度：進(jìn)口血清由于蛋白和脂類含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡；國產(chǎn)血清相對粘稠，顏色略深。
沉淀
觀察：進(jìn)口血清在過濾分裝前很少反復(fù)凍融，成品清澈。但隨著時間推移，血清中的纖維蛋白會析出形成沉淀。
評估：優(yōu)質(zhì)血清在生產(chǎn)后初期應(yīng)清澈無沉淀，長時間存放后可能會有少量沉淀。
免疫球蛋白含量
定義：免疫球蛋白的含量可以反映采血時牛齡情況。胎牛血清不含IgM，IgG含量也較低。
檢測方法：通過免疫學(xué)方法測定IgG和IgM的含量。
評估標(biāo)準(zhǔn)：IgG含量遠(yuǎn)低于標(biāo)準(zhǔn)值，表明采血時牛齡較小，血清質(zhì)量較好。
微生物和病毒含量
定義：微生物包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體及各類病原性病毒，這些微生物會影響血清質(zhì)量。
檢測方法：通過細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)和多種病毒檢測來評估。
評估標(biāo)準(zhǔn)：出廠前經(jīng)過嚴(yán)格檢測，確保無致病變、無血吸附、多種病毒檢測陰性。
批間差
定義：不同批次血清中的微妙成分差異可能導(dǎo)致細(xì)胞適應(yīng)期延長，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
評估標(biāo)準(zhǔn)：通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制篩選和驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)，減少批間差異。
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